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普洱-楚雄石斛小杯苗培育基地研究以金线莲组培苗茎段为试材，采用「二加二」法，即「两步诱导」（1. 利用暗培养诱导出白化茎段；2. 由白化茎段诱导类原球茎）加「两步增殖」（卖株洲的金线莲和铁皮石斛种苗批发 攸县市场价钱多少钱一珠新诱导的类原球茎在诱导培养基上培养 3 周；2. 利用 L16（45）正交试验优选增殖培养方案）的方法，研究外植体来源、外植体处理方式、普洱-楚雄石斛小杯苗培育基地暗培养时间、培养基及附加成分对类原球茎诱导的影响，以及培养时间、光照强度、紫外光照射时间对类原球茎增殖的影响，并比较「二加二」法与传统单步法的培养效果。结果表明，适宜白化茎段诱导类原球茎的培养基为 MS + 2.5 mg/L 6-BA +0.2 mg/L NAA +1.0 mg/L S3307。
利用怒江-临沧金钗石斛丛生苗「二加二」法建立了金线莲类原球茎高效培养新体系，该体系诱导率、初始材料扩大倍数、增殖倍数均高于传统单步诱导法。92% 的类原球茎能够稳定增殖，不发生分化和愈伤组织化。此途径应用较广，但仍存在许多问题：如初代诱导困难，诱导率低[8， 11-12]。王建勤等[12]利用茎节做接种材料诱导率仅为 66%。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 植物材料 金线莲品种为「福建尖叶」，怒江-临沧金钗石斛丛生苗带根组培植株采购于福建金草公司，切取茎段后在本实验室经过连续 1 a 的继代培养，获得长势基本一致的金线莲组培继代植株。1.1.2 试剂 植物生长调节剂 6-苄氨基腺嘌呤（6-Benzylaminopurine，6-BA）、萘乙酸（1-Naphthaleneacetic acid，NAA）、玉米素（Zeatin，ZT）、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4- Dichlorophenoxyacetu001fic acid，2，4-D）。
